Análisis fenotípico de células madre musculares derivadas de células ES humanas

El objetivo general de este proyecto fue utilizar hESC para definir los fenotipos celulares y funcionales de las células madre del músculo humano a medida que se diferencian a lo largo del linaje muscular y evaluar específicamente su capacidad para aumentar el tejido y la función del músculo distrófico. Con este objetivo, evaluamos una línea de hESC indicadora específica de músculo, generamos una segunda línea utilizando otro promotor específico de músculo, desarrollamos tres métodos alternativos para dirigir la diferenciación de mioblastos a partir de hESC en cultivo y probamos inyecciones de células precursoras miogénicas derivadas de hESC en Músculo de las extremidades posteriores de ratones inmunodeficientes.

Las células musculares derivadas de células madre embrionarias humanas (hESC) pueden ser una fuente potencial de terapia celular para regenerar enfermedades musculares. El objetivo de esta subvención ha sido desarrollar métodos eficientes para aislar células madre musculares de hESC que eviten los productos animales, de modo que podamos usarlos para comprender cómo se forman las células musculares y determinar cuál de ellas puede ser mejor para tratar la distrofia muscular.

Nuestro progreso durante el año pasado ha avanzado significativamente los objetivos de este trabajo: 1) Determinar los fenotipos celulares de las células madre del músculo humano a medida que se diferencian en mioblastos, y 2) Determinar la capacidad de las células madre del músculo humano en diferentes etapas de desarrollo para injertarse. , proliferan y se diferencian en músculo en un modelo de distrofia muscular en ratón, y determinan sus efectos funcionales y miomecánicos sobre el músculo distrófico. Ahora tenemos un sistema funcional para derivar células musculares progenitoras tempranas a partir de células madre embrionarias humanas. El protocolo de diferenciación se ha desarrollado lo suficiente como para que se puedan generar células de músculo esquelético a partir de células ES humanas. Hemos identificado puntos a lo largo del proceso de diferenciación en los que prevalecen las células musculares que son menos maduras y posiblemente más parecidas a un tallo. Los datos sugieren que, según los genes que las células expresan en las primeras etapas, el aislamiento y el trasplante de células en esa etapa, pero no más adelante, serán más beneficiosos para el trasplante y la aplicación clínica. Esto nos acerca un paso más a la obtención de células musculares útiles que puedan trasplantarse para tratar trastornos musculares. El plan actual es probar estas células en modelos preclínicos de lesión muscular para evaluar su capacidad para regenerar el músculo lesionado.

Nuestro progreso durante el año pasado ha avanzado los objetivos de este trabajo: 1) Determinar los fenotipos celulares de las células madre del músculo humano a medida que se diferencian en mioblastos, y 2) Determinar la capacidad de las células madre del músculo humano en diferentes etapas de desarrollo para injertarse. proliferar y diferenciarse en músculo en un modelo de distrofia muscular en ratón, y determinar sus efectos funcionales y miomecánicos sobre el músculo distrófico. Hemos derivado células musculares progenitoras tempranas a partir de células madre embrionarias humanas. Hemos utilizado un perfil de marcador de superficie que hemos caracterizado en células madre de músculo humano endógeno para identificar e inducir precursores de músculo humano en nuestros ensayos de diferenciación. Hemos probado varios ensayos de diferenciación mediante el trasplante de células humanas en músculo de ratón. Estamos utilizando la información obtenida al caracterizar las células musculares inducidas para compararlas con las células musculares endógenas que existen naturalmente para aprender cómo derivar de manera eficiente células madre musculares humanas que puedan usarse para tratar enfermedades musculares.