Nueva inmunoterapia rejuvenecida con células T para el cáncer de pulmón

En el estudio, mostramos la prueba de concepto de la inmunoterapia de células T mediada por neoantígenos, en el flujo de trabajo de (1) predicción in silico de candidatos a neoantígenos, (2) detección in vitro si los péptidos predichos tienen inmunogenicidad, (3) purificación de CTL que reconocen neoantígenos y establecimiento de clones de CTL dirigidos a neoantígenos, (4) generación de CTL rejuvenecidos mediante reprogramación y rediferenciación de iPS. También mostramos otra rama del flujo de trabajo mediante el (3') aislamiento de CTL específicos de neoantígeno después de la identificación de repertorios completos de genes TCR mediante NGS, y (4') la transducción de un par de TCRab en los repertorios a una línea celular Jurkat para Compruebe rápidamente si el TCRab es un receptor específico de neoantígeno. Los TCR identificados se pueden utilizar como reemplazo de los TCR endógenos, y las T-iPSC convertidas por tropismo pueden producir CTL rejuvenecidos específicos de neoantígeno.

EGFR C797S y KRAS G12V son las mutaciones que se observan con frecuencia en varios tipos de tumores sólidos, como el cáncer de pulmón, por lo que seleccionamos estas mutaciones como ejemplos en este estudio de prueba de concepto. Se identificaron tres neoantígenos inmunogénicos, que están restringidos en HLA-A*02:01. En realidad, se establecieron clones de CTL que reconocen neoantígenos recientemente identificados a partir de múltiples donantes, así como de CTL rejuvenecidos. Mantuvieron su especificidad antigénica original y mostraron funciones citotóxicas y secreción de citocinas. Ya sabíamos que los CTL rejuvenecidos tienen una mayor citotoxicidad que sus CTL originales en estudios anteriores, por lo que se puede esperar el mismo resultado para la inmunoterapia tumoral en modelos de ratón o situaciones preclínicas. Para contrarrestar problemas de seguridad no deseados, como la tumorigénesis por células madre pluripotentes contaminadas, se introdujo un sistema de protección (Caspasa9 inducible por fármacos) en T-iPSC específicas de neoantígenos mediante una técnica CRISPR/Cas9 altamente eficiente.

Estos datos nos animan a dar un paso adelante en los estudios preclínicos mediante la técnica, así como a encontrar más neoantígenos para muchos otros tipos de tumores utilizando el mismo flujo de trabajo.