Interrogación y reparación de defectos de células satélite y miofibras en DMD humana mediante secuenciación de ARN unicelular/núcleo unicelular de células residentes en músculos
Detalles de la concesión de la subvención
Tipo de subvención:
Conceder número:
DISCO0-15921
Investigador(es):
Enfoque de la enfermedad:
Uso de células madre humanas:
Valor del premio:
$1,578,000
Estatus
Activo
Detalles de la solicitud de subvención
Titulo de la aplicación:
Interrogación y reparación de defectos de células satélite y miofibras en DMD humana mediante secuenciación de ARN unicelular/núcleo unicelular de células residentes en músculos
Resumen público:
Objetivo de la investigación
Describiremos, por primera vez, la dinámica de las células satélite del músculo humano, las miofibras y las células inmunes debido a la deficiencia de distrofina y la terapia génica AAV en el músculo humano con resolución de un solo núcleo.
Impacto
Estos estudios dilucidarán los defectos de las células madre satélite y las miofibras en la distrofia muscular de Duchenne y Becker y determinarán la eficacia, el mecanismo y las toxicidades de la omisión de exones y la terapia génica AAV.
Principales actividades propuestas
Describiremos, por primera vez, la dinámica de las células satélite del músculo humano, las miofibras y las células inmunes debido a la deficiencia de distrofina y la terapia génica AAV en el músculo humano con resolución de un solo núcleo.
Impacto
Estos estudios dilucidarán los defectos de las células madre satélite y las miofibras en la distrofia muscular de Duchenne y Becker y determinarán la eficacia, el mecanismo y las toxicidades de la omisión de exones y la terapia génica AAV.
Principales actividades propuestas
- Continuar el análisis bioinformático del conjunto de datos DMD snseq/scRNAseq existente.
- Realice biopsias y prepare y almacene tejido muscular nuevo, PBMC y poblaciones expandidas de células T y satélite en cultivo y determine la expresión de distrofina.
- Extraiga núcleos para snRNAeq y analice en grupo snRNAseq de biopsia de DMO/DMD recién adquirida en el contexto de nuestro gran conjunto de referencia de datos de snRNAseq de DMD y saludable.
- Realice experimentos piloto que involucren la interacción de competidores TNC/EGFR para realizar un seguimiento de los datos de snRNAseq que identifiquen aumentos en la expresión de TNC en DMD versus músculo sano.
- Recopile una secuencia de snRNA/scRNA y analice biopsias de GT en relación con el conjunto de referencia de snRNAseq.
- Clonar TCR dominantes y detectar especificidad para microdistrofina de distrofina o antígenos peptídicos de distrofina omitidos con exón.
Declaración de beneficio para California:
La distrofia muscular de Duchenne conduce a una discapacidad significativa y muerte prematura debido a la debilidad muscular progresiva, lo que impone importantes consecuencias físicas y financieras a los pacientes y sus familias. Aproximadamente, 1500 familias de California se ven afectadas por la DMD. Existe una gran necesidad insatisfecha ya que no existen tratamientos curativos. Los estudios propuestos pueden conducir a nuevos objetivos para el descubrimiento de fármacos, estrategias terapéuticas para atacar las células madre musculares satélite y mejores terapias genéticas para la DMD.