EDICIÓN DE GEN PARA FOXP3 EN HSC HUMANO
Detalles de la concesión de la subvención
Tipo de subvención:
Conceder número:
DISCO2-09526
Investigador(es):
Enfoque de la enfermedad:
Uso de células madre humanas:
Valor del premio:
$984,228
Estatus
Cerrado
Informe de progreso
Período de información:
Año 3/NCE
Detalles de la solicitud de subvención
Titulo de la aplicación:
EDICIÓN DE GEN PARA FOXP3 EN HSC HUMANO
Resumen público:
Objetivo de la investigación
Edición del gen FOXP9 mediada por CRISPR/Cas3 en células madre hematopoyéticas derivadas de pacientes como cura para el síndrome IPEX
Impacto
La mutación FOXP3 en el síndrome IPEX conduce a una desregulación del sistema inmunológico. El TCMH alogénico, el único tratamiento disponible, tiene resultados muy pobres, incluida la GvHD y una baja reconstitución inmune.
Principales actividades propuestas
Edición del gen FOXP9 mediada por CRISPR/Cas3 en células madre hematopoyéticas derivadas de pacientes como cura para el síndrome IPEX
Impacto
La mutación FOXP3 en el síndrome IPEX conduce a una desregulación del sistema inmunológico. El TCMH alogénico, el único tratamiento disponible, tiene resultados muy pobres, incluida la GvHD y una baja reconstitución inmune.
Principales actividades propuestas
- Demuestre la especificidad de la inserción dirigida del ADNc de FOXP3 - casete ΔNGFR en HSC HD según lo evaluado por la expresión deltaNGFr y la integración genómica correcta del casete de expresión.
- Demuestre que las HSC HD editadas mantienen su potencial de proliferación y diferenciación in vitro mediante cultivo líquido, células formadoras de colonias (CFC) y ensayo de diferenciación de células T.
- Reconstitución de ratones inmunodeficientes (NSG) utilizando HSC de donantes humanos sanos editados genéticamente y demostración del desarrollo in vivo de Teff y Treg.
- Obtenga una edición genética exitosa en HSC de pacientes IPEX y una reconstitución en ratón humano con HSC editadas con el gen FOXP3.
- Demostrar eficacia in vivo mediante la mejora de fenotipos similares a IPEX en ratones hum injertados con HSC IPEX editadas genéticamente, en comparación con aquellos inyectados sin editar.
- no incluido
Declaración de beneficio para California:
La mutación FOXP3 causa una desregulación de las células Treg y Teff que conduce a una desregulación inmune y al síndrome IPEX. Utilizando la edición de genes CRISPR/Cas9, insertaremos una copia de tipo salvaje del gen FOXP3 en HSC derivadas de pacientes, lo que permitirá datos de prueba de concepto preclínicos para ensayos clínicos que podrían reducir las patologías de los pacientes IPEX. Este trabajo será la primera demostración en humanos del potencial curativo de las HSC editadas y ayudará a mantener la posición de liderazgo de California en la investigación y curación de células madre.
Publicaciones
- Ciencia avanzada (2020): La edición de genes basada en CRISPR permite la reparación del gen FOXP3 en células de pacientes IPEX. (PubMed: 32494707)
