Definición del enfoque óptimo de terapia génica de células madre hematopoyéticas humanas para el tratamiento de la deficiencia del dedicador de citocinesis 8 (DOCK8)

La única cura conocida para la deficiencia de DOCK8 es el trasplante alogénico de células madre hematopoyéticas. Sin embargo, este método está limitado por la enfermedad de injerto contra huésped, el empeoramiento de las infecciones crónicas y no es una opción para quienes no tienen un donante compatible con HLA. La terapia génica con células madre mediante trasplante autólogo ofrece la posibilidad de una cura, evitando al mismo tiempo los inconvenientes de las terapias disponibles. Esta propuesta tenía como objetivo desarrollar una plataforma de terapia génica de células madre hematopoyéticas humanas para la deficiencia de DOCK8 mediante la evaluación de dos enfoques principales de terapia génica: la adición de genes mediante vectores lentivirales y la edición génica específica del sitio mediada por CRISPR/Cas9. Hemos demostrado que ambos enfoques son factibles para la deficiencia de DOCK8 y estamos completando los estudios finales en el laboratorio y en modelos de ratón para demostrar la superioridad de uno sobre el otro. Al realizar estos experimentos, nuestro objetivo es identificar un candidato terapéutico bien definido que pueda discutirse con la FDA en una reunión INTERACT dentro de los próximos 8 a 10 meses. Esta reunión ayudará a guiar los experimentos propuestos para la fase de traducción del desarrollo en una solicitud de TRAN al CIRM. 

Gracias a esta oportunidad de financiación del CIRM, se ha logrado un progreso significativo en el desarrollo de una terapia génica para la deficiencia de DOCK8. En primer lugar, se han diseñado y creado todas las herramientas necesarias para identificar el tratamiento más eficaz. Esto incluye el desarrollo de vectores lentivirales, que actúan como sistemas de administración capaces de insertar el gen DOCK8 completo en las células. Estos vectores lentivirales se han probado tanto en líneas celulares inmortales como en células madre humanas primarias de individuos sanos para evaluar su funcionalidad.

Además, se ha desarrollado un enfoque de edición genética para modificar directamente el ADN de las células y corregir el gen DOCK8. Este enfoque incluye el uso de CRISPR/Cas9 para dirigirse al gen DOCK8, junto con varios vectores virales para administrar el ADN terapéutico al sitio diana de CRISPR/Cas9. Este método se ha probado en líneas celulares para evaluar su eficacia.

El siguiente paso es comparar directamente los resultados de estos dos métodos para determinar cuál funciona mejor. Una vez identificado el tratamiento más prometedor, se realizarán pruebas en modelos murinos. Esta etapa es crucial para seleccionar el candidato terapéutico final que podría desarrollarse para su posible uso en pacientes.