C9orf72 repite la supresión alélica ajustada por expansión mediante CRISPRi como terapia para la ELA
Detalles de la concesión de la subvención
Tipo de subvención:
Conceder número:
DISCO2-15010
Investigador(es):
Enfoque de la enfermedad:
Uso de células madre humanas:
Valor del premio:
$2,274,768
Estatus
Activo(s)
Detalles de la solicitud de subvención
Titulo de la aplicación:
C9orf72 repite la supresión alélica ajustada por expansión mediante CRISPRi como terapia para la ELA
Resumen público:
Objetivo de la investigación
Nuestro objetivo es descubrir una terapia génica CRISPRi con virus adenoasociados (AAV) para pacientes con esclerosis lateral amiotrófica (ELA) con expansiones repetidas de hexanucleótidos en el gen C9orf72.
Impacto
Esta terapia se puede administrar por vía intravenosa una vez, tiene efectos duraderos y está indicada para todos los pacientes con ELA que presentan expansiones repetidas de diferentes longitudes y toxicidad en el gen C9orf72.
Principales actividades propuestas
Nuestro objetivo es descubrir una terapia génica CRISPRi con virus adenoasociados (AAV) para pacientes con esclerosis lateral amiotrófica (ELA) con expansiones repetidas de hexanucleótidos en el gen C9orf72.
Impacto
Esta terapia se puede administrar por vía intravenosa una vez, tiene efectos duraderos y está indicada para todos los pacientes con ELA que presentan expansiones repetidas de diferentes longitudes y toxicidad en el gen C9orf72.
Principales actividades propuestas
- Establecer una plataforma celular de alto rendimiento para detectar un ARN guía pequeño (sgRNA) optimizado y un sistema CRISPRi que silencia selectivamente las expansiones repetidas patógenas y largas de C9orf72.
- Genere células neuronales a partir de células madre pluripotentes (iPSC) inducidas por pacientes con ELA C9orf72 y optimice el sistema AAV CRISPRi para reducir los productos tóxicos de ARN y proteínas causados por las expansiones repetidas de C9orf72.
- Pruebe la reproducibilidad del sistema AAV CRISPRi para reducir los productos tóxicos de ARN y proteínas en modelos iPSC de 15 mujeres y 15 hombres con ELA C9orf72 mientras evalúa cualquier efecto genómico fuera del objetivo.
- Optimice la terapia AAV CRISPRi en ratones genéticamente modificados con expansiones repetidas patógenas de C9orf72 y pruebe su capacidad para reducir el ARN tóxico y los productos proteicos mientras se preserva la función motora.
Declaración de beneficio para California:
La ELA afecta actualmente a miles de californianos y no tiene cura. Los pacientes dependen de cuidadores a tiempo completo y las comunidades desatendidas tienen una carga desproporcionada. Utilizamos una combinación racional de tecnologías para tratar esta forma genética de ELA causada por expansiones repetidas del ADN. Si tenemos éxito, nuestro enfoque puede transferirse fácilmente a otras enfermedades de expansión repetida en la neurodegeneración. Esto aliviaría notablemente los riesgos de enfermedades neurodegenerativas que enfrenta una población de California que envejece rápidamente.