Condiciones definidas sin xeno para el cultivo de células madre embrionarias humanas, células madre neurales y neuronas dopaminérgicas derivadas de ellas.

ANTECEDENTES: Las células madre embrionarias humanas (hESC) pueden proporcionar un recurso invaluable para la medicina regenerativa. Para llevar las hESC hacia la clínica, es importante que las células con potencial terapéutico se generen de forma reproducible en condiciones completamente definidas. METODOLOGÍA/HALLAZGOS PRINCIPALES: Aquí informamos un proceso escalable de cuatro pasos que es fácilmente transferible a una instalación de Buenas Prácticas de Fabricación (GMP) para la producción de neuronas dopaminérgicas funcionales a partir de hESC para posibles usos clínicos. Mostramos que cada uno de los pasos (propagación de ESC-->generación de células madre neurales (NSC)-->inducción de precursores dopaminérgicos-->maduración de neuronas dopaminérgicas) podría utilizar medios y sustratos definidos libres de xeno, y que las células podrían almacenarse en etapas intermedias del proceso sin perder su capacidad funcional. Las neuronas generadas por este proceso expresaron marcadores dopaminérgicos A9 y del mesencéfalo y podrían trasplantarse en un momento apropiado del desarrollo para sobrevivir después del trasplante. CONCLUSIONES/SIGNIFICADO: Las hESC y NSC pueden mantenerse en medios definidos libres de xeno durante un período prolongado de tiempo conservando su capacidad de diferenciarse en auténticas neuronas dopaminérgicas. Nuestro sistema de medio definido proporciona un camino hacia un proceso escalable aplicable a GMP de generación de neuronas dopaminérgicas a partir de hESC para aplicaciones terapéuticas, y una fuente lista de una gran cantidad de neuronas para posibles aplicaciones de detección.