Tratamiento in utero del mielomeningocele con células del estroma mesenquimatoso placentario: selección de una línea celular óptima en preparación para ensayos clínicos.
Año de publicación:
2019
Identificación de PubMed:
31672407
Subvenciones de financiación:
Resumen público:
Antecedentes Desarrollamos un ensayo de cultivo celular para determinar si diferentes líneas de células del estroma mesenquimatoso de la placenta (PMSC) pueden proteger a las neuronas cultivadas de la muerte cuando se les administra una toxina. Luego examinamos si estas mismas líneas celulares de PMSC tendrían el mismo efecto neuroprotector en un modelo de espina bífida en un feto de cordero. Métodos Las líneas PMSC se crearon tras el cultivo de tres placentas humanas diferentes de edades tempranas. Las líneas se etiquetaron como A, B y C. Se evaluó su capacidad para proteger a las neuronas moribundas en un modelo de cultivo celular. La espina bífida se creó en 28 fetos de corderos y los corderos se repararon con PMSC sembradas en un andamio de grado clínico de cada línea celular. El número de corderos tratados con cada línea celular diferente fue: 6 con la Línea A, 7 con la Línea B, 5 con la Línea C y 10 corderos no recibieron PMSC. La función motora de los corderos después del nacimiento se calificó con la escala establecida de Clasificación Locomotora de Ovejas (SLR). Una puntuación de 15 denota una función motora normal, mientras que una puntuación de 0 indica una parálisis completa de las extremidades posteriores. Resultados El cultivo celular, las líneas A y B tuvieron un mayor efecto neuroprotector que ninguna PMSC. La línea C no tuvo un efecto neuroprotector mayor que ninguna PMSC. Los corderos tratados con las líneas A y B tuvieron puntuaciones de función motora más altas que los corderos tratados con la línea C o sin PMSC. Conclusión El modelo de cultivo celular utilizado para evaluar la capacidad de una línea de PMSC para proteger las neuronas moribundas en cultivo puede proporcionar información sobre la capacidad de la misma línea celular para proteger las neuronas en un modelo de espina bífida de cordero. Por tanto, el modelo de cultivo celular puede ayudar a predecir si una línea de PMSC ayudará a restaurar la función motora en la espina bífida humana.
Resumen científico:
ANTECEDENTES: Determinamos si los ensayos de potencia in vitro informan qué líneas de células del estroma mesenquimatoso placentario (PMSC) producen altas tasas de deambulación después del tratamiento in útero del mielomeningocele en un modelo ovino. MÉTODOS: Se crearon líneas PMSC después del cultivo de explantes de tres placentas humanas de gestación temprana. La neuroprotección in vitro se evaluó con un modelo de apoptosis neuronal. In vivo, se crearon defectos de mielomeningocele en 28 fetos y se repararon con PMSC a 3x10(5) células/cm(2) de andamio de la Línea A (n=6), Línea B (n=7) y Línea C (n=5 ) y en comparación con ninguna EMSP (n = 10). La deambulación se calificó como >/=13 en la escala de calificación locomotora de ovejas. RESULTADOS: In vitro, las líneas A y B tuvieron mayor capacidad neuroprotectora que ninguna PMSC (1.7 y 1.8 respectivamente frente a 1, p = 0.02, ANOVA). In vivo, las líneas A y B tenían densidades de neuronas grandes más altas que ninguna PMSC (25.2 y 27.9 respectivamente frente a 4.8, p = 0.03, ANOVA). La línea C no tenía una mayor neuroprotección ni una mayor densidad neuronal que ninguna PMSC. In vivo, las líneas A y B tuvieron tasas de deambulación del 83 % y 71 %, respectivamente, en comparación con el 60 % con la línea C y el 20 % sin PMSC. CONCLUSIÓN: El ensayo de neuroprotección in vitro facilitará la selección de líneas PMSC óptimas para uso clínico. NIVEL DE EVIDENCIA: n/a. TIPO DE ESTUDIO: Ciencias básicas.