Inyección intraventricular en el útero y electroporación de embriones de rata E16.
Año de publicación:
2007
Identificación de PubMed:
18997884
Subvenciones de financiación:
Resumen público:
La inyección in vivo en el útero y la electroporación de la neocorteza embrionaria de rata proporcionan una poderosa herramienta para la manipulación de progenitores individuales que recubren las paredes del ventrículo lateral. Esta técnica ahora se usa ampliamente para estudiar los procesos involucrados en la corticogénesis al sobreexpresar o derribar genes y observar los efectos sobre la proliferación, migración y diferenciación celular. En comparación con las estrategias tradicionales de eliminación, la electroporación intrauterina proporciona un medio rápido para manipular una población de células durante una ventana temporal específica. En este protocolo de video describimos la metodología experimental para preparar ratas para la cirugía, exponer los cuernos uterinos mediante laporatomía, inyectar ADN en los ventrículos laterales del embrión en desarrollo, electroporar ADN en los progenitores que recubren la pared lateral y cuidar a los animales después de la cirugía. . Nuestro laboratorio utiliza este protocolo para cirugías en ratas E15-E21; sin embargo, se realiza más comúnmente en E16, como se muestra en este video.
Resumen científico:
La inyección in vivo en el útero y la electroporación de la neocorteza embrionaria de rata proporcionan una poderosa herramienta para la manipulación de progenitores individuales que recubren las paredes del ventrículo lateral. Esta técnica ahora se usa ampliamente para estudiar los procesos involucrados en la corticogénesis al sobreexpresar o derribar genes y observar los efectos sobre la proliferación, migración y diferenciación celular. En comparación con las estrategias tradicionales de eliminación, la electroporación intrauterina proporciona un medio rápido para manipular una población de células durante una ventana temporal específica. En este protocolo de video describimos la metodología experimental para preparar ratas para la cirugía, exponer los cuernos uterinos mediante laporatomía, inyectar ADN en los ventrículos laterales del embrión en desarrollo, electroporar ADN en los progenitores que recubren la pared lateral y cuidar a los animales después de la cirugía. . Nuestro laboratorio utiliza este protocolo para cirugías en ratas E15-E21; sin embargo, se realiza más comúnmente en E16, como se muestra en este video.