Uso de neuronas dopaminérgicas derivadas de células madre pluripotentes humanas para evaluar agentes terapéuticos candidatos para la enfermedad de Parkinson en modelos MPP+ y rotenona.

Para comenzar a desarrollar un sistema de ensayo de alto rendimiento para evaluar una posible terapia con moléculas pequeñas para la enfermedad de Parkinson (EP), hemos realizado un ensayo de bajo rendimiento con una pequeña cantidad de compuestos utilizando neuronas dopaminérgicas derivadas de células madre pluripotentes humanas. Primero evaluamos el papel de 44 compuestos que se sabe que funcionan en sistemas de roedores en un ensayo de 1-metil-4-fenilpiridinio (MPP(+)) en un formato de 96 pocillos utilizando el método 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il). Ensayo de bromuro de )-2,5-difeniltetrazolio como lectura para la neuroprotección. Se utilizó factor neurotrófico derivado de células gliales como control positivo debido a su efecto neuroprotector bien documentado sobre las neuronas dopaminérgicas, y se probaron dos concentraciones de cada fármaco. De 44 compuestos analizados, 16 mostraron un efecto neuroprotector en una o ambas dosis probadas. En el modelo MPP(+) se estableció una curva dosis-respuesta de un subconjunto de los 16 positivos. Además, validamos los efectos neuroprotectores de estos compuestos en la muerte celular neuronal dopaminérgica inducida por rotenona, otro modelo establecido para la EP. Nuestros ensayos basados ​​en neuronas dopaminérgicas primarias humanas proporcionan una plataforma para la detección y/o validación rápida de posibles agentes neuroprotectores en el tratamiento de la EP utilizando células específicas del paciente y muestran la importancia de utilizar células humanas para dichos ensayos.