Generación de teratoma en la cápsula testicular.
Año de publicación:
2011
Identificación de PubMed:
22158256
Subvenciones de financiación:
- Centro TSRI para la investigación de hESC
- Laboratorio colaborativo para la investigación de células madre embrionarias humanas en el Instituto de Investigación Médica Sanford-Burnham
- La matriz de células madre: un mapa de las vías moleculares que definen las células pluripotentes
- Garantizar la seguridad de la terapia celular: un proceso de control de calidad para la purificación y validación celular
Resumen público:
Este es un artículo del Journal of Visualized Experiments (JoVE) que ilustra métodos para generar teratomas a partir de células madre pluripotentes humanas en ratones inmunodeficientes. Este método nos permite examinar y caracterizar una amplia variedad de tejidos formados a partir de células humanas. En general, las células humanas forman tipos de células más maduras en los teratomas que en las placas de cultivo, lo que permite un análisis más extenso del desarrollo humano. El componente de vídeo de este artículo se puede encontrar en http://www.jove.com/video/3177/
Resumen científico:
Las células madre pluripotentes (PSC) tienen la característica única de que pueden diferenciarse en células de las tres capas germinales. Esto los convierte en una herramienta potencialmente valiosa para el tratamiento de muchas enfermedades diferentes. Con la llegada de las células madre pluripotentes inducidas (iPSC) y la investigación continua con células madre embrionarias humanas (hESC), existe la necesidad de ensayos que puedan demostrar que una línea celular particular es pluripotente. La transmisión de la línea germinal ha sido el estándar de oro para demostrar la pluripotencia de las líneas de células madre embrionarias de ratón (mESC) (1,2,3). Utilizando este ensayo, los investigadores pueden demostrar que una línea mESC puede producir todos los tipos de células en el embrión, incluidas las células germinales(4). Con la generación de líneas ESC humanas (5,6), el ensayo apropiado para demostrar la pluripotencia de estas células no estaba claro, ya que las ESC humanas no pueden analizarse para determinar la transmisión de la línea germinal. Como sustituto, el ensayo de teratoma se utiliza actualmente para demostrar la pluripotencia de las células madre pluripotentes humanas (hPSC) (7,8,9). Aunque este ensayo ha sido objeto de escrutinio recientemente y se están explorando activamente nuevas tecnologías, el ensayo de teratoma es el estándar de oro actual (7). En este ensayo, las células en cuestión se inyectan en un ratón inmunocomprometido. Si las células son pluripotentes, eventualmente se desarrollará un teratoma y las secciones del tumor mostrarán tejidos de las 3 capas germinales (10). En el ensayo de teratoma, se pueden inyectar hPSC en diferentes áreas del ratón. Los lugares de inyección más comunes incluyen la cápsula testicular, la cápsula renal y el hígado; o en la pierna ya sea por vía subcutánea o intramuscular(11). Aquí describimos un protocolo sólido para la generación de teratomas a partir de hPSC utilizando la cápsula testicular como sitio para el crecimiento tumoral.