Una línea informadora neuroglial específica generada por recombinación homóloga en células madre embrionarias humanas.

En este estudio, nos dirigimos a Olig2, un factor de transcripción básico de hélice-bucle-hélice que desempeña un papel importante en el desarrollo de motoneuronas y oligodendrocitos, en la línea BG01 de células madre embrionarias humanas (hESC) mediante recombinación homóloga. Un alelo del locus Olig2 fue reemplazado por un casete de proteína fluorescente verde (GFP) con una eficiencia de focalización del 5.7%. El clon objetivo R-Olig2 (al igual que los otros clones) conservó la pluripotencia, la morfología típica de hESC y un cariotipo parental normal 46,XY. Lo más importante es que la expresión de GFP recapituló la expresión endógena de Olig2 cuando R-Olig2 fue inducida por Sonic hedgehog y ácido retinoico, y las células positivas para GFP pudieron purificarse mediante clasificación de células activadas por fluorescencia. De acuerdo con informes anteriores sobre roedores, las células que expresan GFP tempranas parecían predispuestas a un destino neuronal, mientras que las células que expresaban GFP tardías parecían predispuestas a un destino oligodendrocítico. Esto fue corroborado por el cocultivo de mioblastos, el trasplante en la médula espinal de ratas y el perfil de expresión del genoma completo. El presente trabajo informa sobre una línea informadora de hESC generada por recombinación homóloga dirigida a un gen específico del linaje neuronal, que puede diferenciarse y clasificarse para obtener poblaciones progenitoras neuronales puras.