Corrección genética dirigida de mutaciones de LMNA asociadas a laminopatía en iPSC específicas de pacientes.
Año de publicación:
2011
Identificación de PubMed:
21596650
Subvenciones de financiación:
- La matriz de células madre: un mapa de las vías moleculares que definen las células pluripotentes
- Tolerancia basada en el timo a las terapias con células madre
- Garantizar la seguridad de la terapia celular: un proceso de control de calidad para la purificación y validación celular
- Formación en Biología de Células Madre Embrionarias Humanas y Tecnologías Emergentes II
Resumen público:
La combinación de enfoques basados en células madre con tecnologías de edición de genes representa una estrategia atractiva para estudiar enfermedades humanas y desarrollar terapias. Sin embargo, las metodologías de edición de genes descritas hasta la fecha para células humanas adolecen de limitaciones técnicas que incluyen un tamaño limitado del gen objetivo, una baja eficiencia de orientación en loci transcripcionalmente inactivos y efectos genéticos fuera del objetivo que podrían obstaculizar una amplia aplicación clínica. Para abordar estas limitaciones, y como prueba de principio, nos centramos en la corrección genética basada en recombinación homóloga de múltiples mutaciones en la lámina A (LMNA), que están asociadas con diversas enfermedades degenerativas. Mostramos que los vectores adenovirales dependientes de ayuda (HDAdV) proporcionan un método altamente eficiente y seguro para corregir mutaciones en grandes regiones genómicas en células madre pluripotentes inducidas por humanos y también pueden ser eficaces en células madre mesenquimales humanas adultas. Este tipo de enfoque podría usarse para generar líneas celulares con genotipo coincidente para el modelado de enfermedades y el descubrimiento de fármacos y potencialmente también en terapia.
Resumen científico:
La combinación de enfoques basados en células madre con tecnologías de edición de genes representa una estrategia atractiva para estudiar enfermedades humanas y desarrollar terapias. Sin embargo, las metodologías de edición de genes descritas hasta la fecha para células humanas adolecen de limitaciones técnicas que incluyen un tamaño limitado del gen objetivo, una baja eficiencia de orientación en loci transcripcionalmente inactivos y efectos genéticos fuera del objetivo que podrían obstaculizar una amplia aplicación clínica. Para abordar estas limitaciones, y como prueba de principio, nos centramos en la corrección genética basada en recombinación homóloga de múltiples mutaciones en la lámina A (LMNA), que están asociadas con diversas enfermedades degenerativas. Mostramos que los vectores adenovirales dependientes de ayuda (HDAdV) proporcionan un método altamente eficiente y seguro para corregir mutaciones en grandes regiones genómicas en células madre pluripotentes inducidas por humanos y también pueden ser eficaces en células madre mesenquimales humanas adultas. Este tipo de enfoque podría utilizarse para generar líneas celulares con genotipo coincidente para el modelado de enfermedades y el descubrimiento de fármacos y, potencialmente, también en terapia.