Biomarcadores de lectinas específicos para el aislamiento de células madre pluripotentes humanas identificados mediante análisis glucómico basado en matrices.
Año de publicación:
2011
Identificación de PubMed:
21894191
Subvenciones de financiación:
- Centro TSRI para la investigación de hESC
- La matriz de células madre: un mapa de las vías moleculares que definen las células pluripotentes
- Generación de modelos de enfermedades para trastornos neurodegenerativos en hESC mediante orientación genética
- Garantizar la seguridad de la terapia celular: un proceso de control de calidad para la purificación y validación celular
- Capacitación de investigadores de células madre en la interfaz química-biología
- Programa de pasantías en células madre SDSU/CIRM
Resumen público:
Se necesitan con urgencia métodos rápidos y confiables para aislar poblaciones de células madre pluripotentes humanas (hPSC) para el control de calidad en la investigación básica y en aplicaciones de terapia basada en células. Utilizando matrices de lectinas, analizamos glicoproteínas extraídas de 26 muestras de hPSC y 22 muestras de células diferenciadas, e identificamos un pequeño grupo de lectinas con firmas de unión distintivas que fueron suficientes para distinguir las hPSC de una variedad de tipos de células no pluripotentes. Estos biomarcadores específicos fueron compartidos por las 12 muestras de células madre embrionarias humanas y las 14 de células madre pluripotentes inducidas humanas examinadas, independientemente del laboratorio de origen, las condiciones de cultivo, el tipo de célula somática reprogramada o el método de reprogramación utilizado. Demostramos una aplicación práctica de la unión específica de lectinas mediante la detección de hPSC dentro de una población de células diferenciadas con tinción mediada por lectina seguida de microscopía de fluorescencia y citometría de flujo, y enriqueciendo y purgando hPSC viables de poblaciones de células mixtas mediante separación celular mediada por lectina. El análisis global de la expresión genética mostró una expresión diferencial asociada a la pluripotencia de fucosiltransferasas y sialiltransferasas específicas, que pueden ser la base de estas diferencias en la glicosilación de proteínas y la unión de lectinas. En conjunto, nuestros resultados muestran que la glicosilación de proteínas difiere considerablemente entre células pluripotentes y no pluripotentes, y demuestran que las lectinas pueden usarse como biomarcadores para monitorear la pluripotencia en poblaciones de células madre y para la eliminación de hPSC viables de poblaciones de células mixtas.
Resumen científico:
Se necesitan con urgencia métodos rápidos y confiables para aislar poblaciones de células madre pluripotentes humanas (hPSC) para el control de calidad en la investigación básica y en aplicaciones de terapia basada en células. Utilizando matrices de lectinas, analizamos glicoproteínas extraídas de 26 muestras de hPSC y 22 muestras de células diferenciadas, e identificamos un pequeño grupo de lectinas con firmas de unión distintivas que fueron suficientes para distinguir las hPSC de una variedad de tipos de células no pluripotentes. Estos biomarcadores específicos fueron compartidos por las 12 muestras de células madre embrionarias humanas y las 14 de células madre pluripotentes inducidas humanas examinadas, independientemente del laboratorio de origen, las condiciones de cultivo, el tipo de célula somática reprogramada o el método de reprogramación utilizado. Demostramos una aplicación práctica de la unión específica de lectinas mediante la detección de hPSC dentro de una población de células diferenciadas con tinción mediada por lectina seguida de microscopía de fluorescencia y citometría de flujo, y enriqueciendo y purgando hPSC viables de poblaciones de células mixtas mediante separación celular mediada por lectina. El análisis global de la expresión genética mostró una expresión diferencial asociada a la pluripotencia de fucosiltransferasas y sialiltransferasas específicas, que pueden ser la base de estas diferencias en la glicosilación de proteínas y la unión de lectinas. En conjunto, nuestros resultados muestran que la glicosilación de proteínas difiere considerablemente entre células pluripotentes y no pluripotentes, y demuestran que las lectinas pueden usarse como biomarcadores para monitorear la pluripotencia en poblaciones de células madre y para la eliminación de hPSC viables de poblaciones de células mixtas. publicación del 6 de septiembre de 2011; doi: 10.1038/cr.2011.148.