Cultivo de cortes organotípicos de cerebros de ratas E18.
Año de publicación:
2007
Identificación de PubMed:
18997883
Subvenciones de financiación:
Resumen público:
Los cultivos de cortes organotípicos de cerebros embrionarios de roedores se utilizan ampliamente para estudiar el desarrollo del cerebro. Si bien a menudo existen ventajas para un sistema in vivo, los cultivos de cortes organotípicos permiten realizar una serie de manipulaciones que actualmente no son factibles in vivo. Hasta la fecha, se han utilizado cultivos organtotípicos de cortes de cerebro embrionario para seguir células individuales mediante microscopía de lapso de tiempo, manipular la expresión de genes en las emanaciones ganglionares (una región difícil de detectar mediante electroporación intrauterina), así como con fines farmacológicos. estudios. En este protocolo de vídeo demostramos cómo hacer cultivos de cortes organotípicos a partir de embriones embrionarios de rata del día 18. El protocolo implica diseccionar los embriones, incrustarlos en hielo en agarosa de bajo punto de fusión, cortar los cerebros incrustados en el vibratomo y, finalmente, colocar las rodajas en filtros en placas de cultivo. Este protocolo también es aplicable en su forma actual para realizar cultivos de cortes organotípicos de diferentes edades embrionarias tanto para ratas como para ratones.
Resumen científico:
Los cultivos de cortes organotípicos de cerebros embrionarios de roedores se utilizan ampliamente para estudiar el desarrollo del cerebro. Si bien a menudo existen ventajas para un sistema in vivo, los cultivos de cortes organotípicos permiten realizar una serie de manipulaciones que actualmente no son factibles in vivo. Hasta la fecha, se han utilizado cultivos organtotípicos de cortes de cerebro embrionario para seguir células individuales mediante microscopía de lapso de tiempo, manipular la expresión de genes en las emanaciones ganglionares (una región difícil de detectar mediante electroporación intrauterina), así como con fines farmacológicos. estudios. En este protocolo de vídeo demostramos cómo hacer cultivos de cortes organotípicos a partir de embriones embrionarios de rata del día 18. El protocolo implica diseccionar los embriones, incrustarlos en hielo en agarosa de bajo punto de fusión, cortar los cerebros incrustados en el vibratomo y, finalmente, colocar las rodajas en filtros en placas de cultivo. Este protocolo también es aplicable en su forma actual para realizar cultivos de cortes organotípicos de diferentes edades embrionarias tanto para ratas como para ratones.