Un modelo de ratón de en el útero El trasplante.

El trasplante de células madre y virus en el útero tiene un enorme potencial para tratar trastornos congénitos en el feto humano. Por ejemplo, el trasplante intraútero (TI) de células madre hematopoyéticas se ha utilizado para tratar con éxito a pacientes con inmunodeficiencia combinada grave.(1,2) Sin embargo, en varias otras afecciones, el TIU se ha intentado sin éxito.(3) Según los resultados, la disponibilidad de un modelo no humano eficiente para estudiar las secuelas biológicas del trasplante de células madre y la terapia génica es fundamental para avanzar en este campo. Nosotros y otros hemos utilizado el modelo de ratón de IUT para estudiar los factores que afectan el injerto exitoso de células madre hematopoyéticas trasplantadas en el útero tanto en ratones de tipo salvaje (4-7) como en aquellos con enfermedades genéticas. (8,9) El entorno fetal también ofrece ventajas considerables para el éxito de la terapia génica in utero. Por ejemplo, la administración de vectores adenovirales(10), virales adenoasociados(10), retrovirales(11) y lentivirales(12,13) ​​al feto ha resultado en la transducción de múltiples órganos distantes del sitio de inyección con expresión genética a largo plazo. Por lo tanto, la terapia génica in útero puede considerarse como una posible estrategia de tratamiento para trastornos de un solo gen como la distrofia muscular o la fibrosis quística. Otra ventaja potencial de la IUT es la capacidad de inducir tolerancia inmune a un antígeno específico. Como se observa en ratones con hemofilia, la introducción temprana del factor IX en el desarrollo produce tolerancia a esta proteína.(14) Además de su uso en la investigación de posibles terapias humanas, el modelo de ratón de IUT puede ser una herramienta poderosa para estudiar cuestiones básicas. en biología del desarrollo y de células madre. Por ejemplo, se pueden administrar varias moléculas pequeñas para inducir o inhibir la expresión de genes específicos en etapas gestacionales definidas y manipular las vías de desarrollo. El impacto de estas alteraciones se puede evaluar en varios momentos después del trasplante inicial. Además, se pueden trasplantar células progenitoras pluripotentes o específicas de linaje al entorno fetal para estudiar la diferenciación de células madre en un entorno huésped no irradiado y imperturbado. El modelo de ratón de IUT ya ha proporcionado numerosos conocimientos en los campos de la inmunología y la biología de células madre y del desarrollo. En este protocolo basado en video, describimos un enfoque paso a paso para realizar IUT en fetos de ratón y describimos los pasos críticos y los posibles obstáculos de esta técnica.