Expansión ex vivo a largo plazo de células madre hematopoyéticas de ratón.
Año de publicación:
2020
Identificación de PubMed:
31915389
Subvenciones de financiación:
Resumen público:
Este artículo proporciona un protocolo paso a paso sobre cómo cultivar células madre formadoras de sangre de ratón funcionales a largo plazo en un plato. El método tiene numerosas aplicaciones en biología de células madre, medicina regenerativa, hematología e inmunología.
Resumen científico:
Utilizando capacidades multipotentes y autorrenovables, las células madre hematopoyéticas (HSC) pueden mantener la hematopoyesis durante toda la vida. Sin embargo, el mecanismo detrás de capacidades tan notables aún no se ha descubierto, al menos en parte debido a la escasez de HSC y la modesta expansión ex vivo de HSC en medios que contienen suplementos de albúmina mal definidos, como la albúmina sérica bovina. Aquí, describimos una plataforma simple para la expansión de HSC de ratón funcionales ex vivo durante> 1 mes en condiciones libres de albúmina completamente definidas. El sistema de cultivo permite una expansión de 236 a 899 veces en el transcurso de un mes y también es susceptible de análisis clonal de la heterogeneidad de HSC. La gran cantidad de HSC expandidas permite el trasplante de HSC en receptores no condicionados, lo que de otro modo no sería factible de manera rutinaria debido a la gran cantidad de HSC requeridas. Por lo tanto, este protocolo proporciona un enfoque poderoso con el cual interrogar la autorrenovación del HSC y el compromiso del linaje y, más ampliamente, estudiar y caracterizar los sistemas hematopoyético e inmunológico.