Los cultivos de hígado fetal humano respaldan múltiples linajes celulares que pueden injertar ratones inmunodeficientes.
Año de publicación:
2017
Identificación de PubMed:
29237808
Subvenciones de financiación:
Resumen público:
En este informe, Fomin y sus colegas han creado cultivos de células hepáticas fetales humanas que sustentan muchos de los diferentes tipos de células que se encuentran en el hígado durante el desarrollo prenatal. Estos incluyen hepatoblastos fetales, los precursores de los hepatocitos y las células biliares, así como células endoteliales especializadas, conocidas como células endoteliales sinusoidales del hígado, que se encuentran únicamente en el hígado. Los cultivos de hígado también contenían células madre sanguíneas. El trasplante de células hepáticas cultivadas en ratones, modificadas para aceptar células humanas, demostró el injerto de hepatocitos y células endoteliales en el hígado y el establecimiento de un sistema inmunológico humano. Este trabajo demostró por primera vez un sistema de cultivo que admite múltiples linajes celulares que se encuentran en el hígado en desarrollo. El trabajo también demostró que las células endoteliales sinusoidales del hígado pueden cultivarse y trasplantarse con éxito. Estas células endoteliales son la fuente principal de factor VIII, el factor de coagulación que falta o está reducido en pacientes con hemofilia A. El trasplante de células endoteliales sinusoidales del hígado puede ofrecer un nuevo método de tratamiento de pacientes con hemofilia A. La capacidad de cultivar estas células en El cultivo es un paso importante en el desarrollo de métodos ex vivo para expandir estas células para trasplante. Estas células endoteliales sobrevivieron y crecieron en cultivos sin la adición de ningún factor de crecimiento que apoyara el crecimiento de las células endoteliales, lo que indica que los factores de crecimiento y las señales celulares requeridas por estas células para la supervivencia los proporcionaban las otras células en los cultivos. Por tanto, estos cultivos proporcionan un medio para explorar más a fondo las complejas interacciones entre las células endoteliales sinusoidales del hígado y otras células del hígado. Se demostró un injerto robusto de células endoteliales sinusoidales del hígado humano en dos líneas de ratones inmunodeficientes, uno con daño hepático crónico y el otro con daño hepático agudo, demostrando así que el injerto y el crecimiento de células endoteliales sinusoidales del hígado no requiere un estado crónico de daño hepático. . Este es un hallazgo importante con respecto a la idea de una terapia celular para la hemofilia A, ya que estos pacientes tienen una función hepática normal. Los estudios de trasplantes en animales sugieren que las células endoteliales sinusoidales del hígado trasplantadas pueden expandirse en el hígado de un receptor de trasplante. Los cultivos de hígado recientemente descritos ofrecen evidencia de que las células endoteliales sinusoidales del hígado pueden expandirse en cultivo y los trasplantes en ratones humanizados muestran que estas células cultivadas aún pueden injertarse y crecer aún más en el hígado. Este trabajo respalda la idea de que una terapia celular para la hemofilia A basada en el trasplante de células endoteliales sinusoidales del hígado puede ser una opción viable en el futuro para tratar este trastorno hemorrágico.
Resumen científico:
Durante el desarrollo prenatal, el hígado se compone de múltiples tipos de células con propiedades únicas en comparación con sus homólogos adultos. Nuestro objetivo era establecer cultivos multilinaje de células hepáticas fetales humanas que pudieran mantener las poblaciones de células madre y progenitores que se encuentran en el hígado en desarrollo. Un objetivo de este estudio fue probar si la maduración de los hepatocitos fetales en cultivos a corto plazo respaldados por factor de crecimiento epidérmico y oncostatina M puede mejorar su capacidad para injertar ratones inmunodeficientes. Los cultivos de hígado fetal respaldaron una mezcla de albúmina(+) citokertina-19(+), hepatoblastos, hepatocitos, colangiocitos, células endoteliales sinusoidales hepáticas CD14(++)CD32(+) (LSEC) y tallo hematopoyético CD34(+)CD133(+). células. El trasplante de células cultivadas en ratones uPA-NOG o TK-NOG produjo un injerto de hepatocitos a largo plazo, un injerto de LSEC abundante y hematopoyesis multilinaje. El injerto hematopoyético incluyó la reconstitución de linfocitos B, T y NK. Se observaron colonias de hepatocitos humanos polarizados rodeados de LSEC humanas en contacto con células sanguíneas CD45(+) humanas en los sinusoides hepáticos. Por lo tanto, los cultivos de hígado fetal respaldan múltiples linajes celulares, incluidas las LSEC y las células madre hematopoyéticas, al tiempo que promueven la capacidad de los hepatocitos fetales para injertar hígados de ratones adultos. Los cultivos de hígado fetal y los ratones humanizados con hígado creados a partir de estos cultivos pueden proporcionar sistemas modelo útiles para estudiar el desarrollo, la función y la enfermedad del hígado.