Las células tipo Treg diseñadas por humanos suprimen las células T deficientes en FOXP3 pero preservan las respuestas inmunes adaptativas in vivo.

Objetivos: Los defectos genéticos o adquiridos en las células T reguladoras (Treg) FOXP3(+) desempeñan un papel clave en muchas enfermedades inmunomediadas, incluida la poliendocrinopatía por desregulación inmunitaria, la enteropatía y el síndrome ligado al cromosoma X (IPEX). Anteriormente, demostramos que las células T CD4(+) de donantes sanos y pacientes IPEX se pueden convertir en células similares a Treg funcionales mediante la transferencia lentiviral de FOXP3 (CD4(LVFOXP3)). Estas células CD4 (LVFOXP3) tienen una potente función reguladora, lo que sugiere su potencial como terapia innovadora. Aquí, presentamos datos moleculares y preclínicos in vivo que respaldan la progresión clínica de las células CD4 (LVFOXP3). Métodos: La caracterización molecular de las células CD4 (LVFOXP3) incluyó citometría de flujo, qPCR, RNA-seq y TCR-seq. La función supresora in vivo de las células CD4 (LVFOXP3) se evaluó en modelos de ratones humanizados similares a IPEX con deficiencia de FOXP3 y enfermedad de xenoinjerto contra huésped (xeno-GvHD). La seguridad de las células CD4 (LVFOXP3) se evaluó utilizando ratones humanizados (hu) de sangre periférica (PB) para probar su impacto en la respuesta inmune contra patógenos y la vigilancia inmune contra antígenos tumorales. Resultados: Demostramos que la conversión de células T CD4(+) en células CD4(LVFOXP3) conduce a cambios transcripcionales específicos en comparación con la transducción de células T CD4(+) en ausencia de FOXP3, incluida la regulación positiva de genes relacionados con Treg. Además, observamos la preservación específica de un repertorio de TCR policlonal durante la producción de células in vitro. Tanto las células CD4 (LVFOXP3) alogénicas como las autólogas protegen contra xeno-GvHD después de dos infusiones secuenciales de células T efectoras. Las células CD4 (LVFOXP3) previenen la hiperproliferación de células T de memoria CD4 (+) en ratones hu-tipo IPEX con deficiencia de FOXP3. Las células CD4 (LVFOXP3) no impiden la expansión in vivo de las células T preparadas con antígeno ni la eliminación del tumor en los ratones PB hu. Conclusión: Estos datos respaldan la preparación clínica de las células CD4 (LVFOXP3) para tratar el síndrome IPEX y otras enfermedades inmunomediadas causadas por FOXP3(+) Treg insuficientes o disfuncionales.