Edición genética de células madre embrionarias humanas mediante un vector baculoviral diseñado que transporta nucleasas con dedos de zinc.
Año de publicación:
2011
Identificación de PubMed:
21326219
Subvenciones de financiación:
Resumen público:
Las células madre proporcionan potencialmente herramientas poderosas para analizar la función de genes específicos, una tecnología experimental que ha demostrado ser revolucionaria en el ratón. Sin embargo, ha resultado difícil realizar cambios específicos en el genoma de las células madre embrionarias humanas. Desarrollamos una nueva técnica para producir modificaciones genéticas específicas en células madre embrionarias humanas. Esta tecnología será útil en el desarrollo de nuevas líneas de células madre para estudiar la función genética y el papel de los genes en las enfermedades.
Resumen científico:
Las células madre embrionarias humanas (hES) son fuentes de células renovables que tienen aplicaciones potenciales en la medicina regenerativa. El desarrollo de tecnologías para producir modificaciones genómicas permanentes y específicas de un sitio es una demanda para lograr la futura implementación médica de las células hES. En este documento informamos que un sistema de vector baculoviral (BV) que porta nucleasas con dedos de zinc (ZFN) puede modificar con éxito el genoma de las células hES. La expresión transitoria de ZFN mediada por BV alteró específicamente el locus CCR5 en las células transducidas y las células modificadas mostraron resistencia a la transducción del VIH-1. Para convertir el BV en un vector dirigido a genes, se incorporaron al vector una plantilla de donante de ADN y ZFN. Estos vectores híbridos produjeron una adición permanente de genes específicos del sitio tanto en líneas celulares humanas inmortalizadas (10%) como en células hES (5%). Las células hES modificadas eran cariotípicamente normales y pluripotentes. Estos resultados sugieren que este sistema de administración de baculovirus se puede diseñar para la manipulación genética de un sitio específico en células hES.