La heterogeneidad epitelial/mesenquimatosa de muestras de carcinoma de ovario seroso de alto grado se correlaciona con los niveles de miARN let-7 y predice el crecimiento tumoral y la metástasis.
Año de publicación:
2020
Identificación de PubMed:
32652647
Subvenciones de financiación:
Resumen público:
Estudiamos células derivadas en nuestro laboratorio de muestras de pacientes. La ventaja de las muestras obtenidas de pacientes es que representan la diversidad en diferentes pacientes con cáncer de ovario. Muchos estudios utilizan líneas celulares que originalmente provenían de tumores, pero que pueden haber sido cultivadas en una incubadora durante décadas. En ese tiempo, las células pueden cambiar desde su estado inicial: pueden sufrir mutaciones, sus cromosomas pueden volverse inestables y muchos de los tipos de células raras presentes originalmente pueden haberse perdido. Además, centrar los estudios del cáncer de ovario en líneas celulares de unos pocos pacientes nos impide conocer las grandes diferencias entre las células de diferentes pacientes. Nos interesan especialmente las diferencias entre muestras en cuanto a las células madre contenidas en los tumores. Exploramos estas diferencias en el contexto de la transición epitelio-mesénquima, un proceso que hace que las células sean más agresivas (capaces de migrar e invadir y, por lo tanto, más capaces de metastatizar). Descubrimos que podemos clasificar las células derivadas de pacientes utilizando una puntuación EMT, que mide la expresión genética a nivel de ARN. También determinamos las diferencias en la morfología o forma de las células y estudiamos las moléculas de la superficie celular que se ha demostrado que actúan como marcadores del estado de las células madre. Algunos estudios han propuesto que el fenotipo mesenquimal está asociado con las características de las células madre, pero en este estudio, las muestras con características más epiteliales se parecían más a las células madre y pudieron formar tumores en ratones, en comparación con aquellas que eran más fuertemente mesenquimales. También estudiamos un pequeño ARN, un microARN, llamado let-7, y descubrimos que existía una correlación inversa entre él y las características de las células madre. Los niveles más bajos de let-7 se asociaron con el estado epitelial y con la sensibilidad al cisplatino. Las células con niveles más bajos de let-7 eran más tumorigénicas, pero menos migratorias y con una puntuación EMT más baja que aquellas con niveles más altos de let-7. Concluimos que la expresión de let-7 y el estado epitelial/mesenquimatoso son predictores valiosos de la proliferación del cáncer de ovario, la autorrenovación in vitro y la carga tumoral in vivo.
Resumen científico:
Las muestras obtenidas de pacientes presentan una ventaja sobre los modelos de líneas celulares actuales de cáncer de ovario seroso de alto grado (HGSOC) que no siempre son modelos confiables y fenotípicamente fieles de HGSOC in vivo. Para mejorar los modelos de líneas celulares de HGSOC, nos propusimos caracterizar un panel de células derivadas de pacientes y determinar sus características epiteliales y mesenquimales. Analizamos los niveles de expresión de ARN y proteínas en modelos de HGSOC de xenoinjerto derivado de pacientes (PDX) y caracterizamos funcionalmente estos modelos mediante citometría de flujo, ensayos de cicatrización de heridas, ensayos de invasión y cultivos de esferoides. Además del trabajo in vitro, también evaluamos las características de crecimiento de PDX in vivo (PDX ortotópico). Descubrimos que todas las muestras tenían características híbridas, que cubrían un espectro desde un estado epitelial a mesenquimatoso. Las muestras con un fenotipo epitelial más fuerte fueron más activas en los ensayos de autorrenovación y más tumorigénicas en modelos de xenoinjerto ortotópico en comparación con las muestras con un fenotipo mesenquimatoso más fuerte, que eran más migratorias e invasivas. Además, observamos una asociación inversa entre la expresión del microARN let-7 (letal-7) y la potencia, consistente con la pérdida de let-7 como un componente importante del fenotipo de las células madre cancerosas. Observamos que los niveles más bajos de let-7 se asociaron con el estado epitelial y una puntuación más baja de transición mesenquimal epitelial (EMT), una formación de esferoides y tumores más eficiente y una mayor sensibilidad a la quimioterapia basada en platino. Sorprendentemente, en estas células HGSOC, la potencia podría disociarse de la invasividad: las células con niveles más bajos de let-7 eran más tumorigénicas, pero menos migratorias y con una puntuación EMT más baja, que aquellas con niveles más altos de let-7. Concluimos que la expresión de let-7 y el estado epitelial/mesenquimatoso son predictores valiosos de la proliferación de HGSOC, la autorrenovación in vitro y la carga tumoral in vivo.