Generación eficiente de precursores y progenitores hematopoyéticos a partir de líneas de células madre pluripotentes humanas.

Al imitar el desarrollo embrionario del sistema hematopoyético, hemos desarrollado un protocolo de diferenciación in vitro optimizado para la generación de precursores de linajes hematopoyéticos y células hematopoyéticas primitivas a partir de células madre embrionarias (ES) humanas y células madre pluripotentes inducidas (iPS). Se probaron factores como citoquinas, componentes de la matriz extracelular y moléculas pequeñas, así como la asociación temporal y la concentración de estos factores en siete líneas ES e iPS humanas diferentes. Informamos la diferenciación de hasta un 84% de células huCD45+ (promedio 41% +/- 16, de 7 líneas pluripotentes) a partir del cultivo de diferenciación, incluido un número significativo de progenitores hematopoyéticos primitivos CD45+/CD34+ y CD45+/CD34+/CD38-. Además, el número de células progenitoras hematopoyéticas generadas, medido mediante ensayos de unidades formadoras de colonias, fue comparable al número obtenido de aislados de células mononucleares de sangre de cordón umbilical fresco por célula CD45+. Nuestro enfoque demuestra una generación altamente eficiente de progenitores hematopoyéticos multipotentes con las eficiencias más altas reportadas hasta la fecha (CD45+/CD34+) utilizando un único protocolo de diferenciación estandarizado en varias líneas ES e iPS humanas. Nuestros datos se suman a la evidencia acumulada de la existencia de un precursor derivado in vitro de la célula madre hematopoyética (HSC) con capacidad limitada de injerto en ratones trasplantados, pero con potencial hematopoyético multipotente. Debido a que este protocolo expande eficientemente los precursores pre-sanguíneos y los progenitores hematopoyéticos, es ideal para probar factores novedosos para la generación y expansión de HSC definitivas con capacidad de repoblación a largo plazo.