La combinación de ADN de virus adenoasociados produce una progenie viral funcionalmente diversa.

Los vectores de virus adenoasociados (AAV) son vehículos de administración de genes extremadamente eficaces para una amplia gama de aplicaciones. Sin embargo, la eficacia terapéutica de estos y otros vectores está actualmente limitada por barreras para la administración segura y eficiente de genes, incluida la inmunidad antiviral preexistente y la infección de células no objetivo. Recientemente, hemos implementado una evolución dirigida de AAV, que implica la generación de bibliotecas virales mutagenizadas aleatoriamente basadas en el serotipo 2 y una selección de alto rendimiento, para diseñar vectores virales mejorados. Aquí, ampliamos significativamente esta capacidad al realizar una recombinación in vitro de alta eficiencia para crear una biblioteca grande (10 (7)) y diversa de quimeras aleatorias de numerosos serotipos originales de AAV (AAV1, 2, 4-6, 8 y 9). . Para analizar hasta qué punto estos virus altamente quiméricos pueden ser viables, seleccionamos la biblioteca para un empaquetado e infección viral eficiente y recuperamos con éxito numerosas quimeras novedosas. Estos nuevos virus exhibieron una amplia gama de tropismo celular tanto in vitro como in vivo y una mayor resistencia a la inmunoglobulina intravenosa humana (IVIG), destacando numerosas diferencias funcionales entre estas quimeras y sus serotipos originales. Por lo tanto, la evolución dirigida puede producir potencialmente un número ilimitado de nuevas variantes de AAV con nuevas propiedades de administración de genes, y el análisis posterior de estas variantes puede ampliar aún más el conocimiento básico de la biología de AAV.