Derivación de líneas de células madre embrionarias humanas a partir de blastómeros biopsiados en alimentadores humanos con exposición mínima a xenomateriales.

En un esfuerzo continuo por mejorar la generación de líneas de células madre embrionarias humanas (hESC) de grado terapéutico, nos centramos en preservar la capacidad de desarrollo de los embriones, minimizar la exposición a xenomateriales, aumentar la eficacia de la derivación y reducir la complejidad del procedimiento de derivación. En este estudio, describimos un método mejorado para la derivación eficiente de líneas hESC a partir de blastómeros de embriones biopsiados. Nuestro protocolo sustituyó las células alimentadoras de origen de ratón con fibroblastos de prepucio humano (HFF), limitó la exposición sérica de las células a la formación del crecimiento inicial y aumentó la eficacia de derivación del 12.5 % (una línea de hESC de 13 biopsias) al 50 % (3 de de 6 biopsias) mediante el uso de HFF de duplicación temprana de la población (PD). Además, eliminó la necesidad de cocultivo de embrión-blastómero, reduciendo así la complejidad del cultivo y permitiendo el desarrollo continuo del embrión biopsiado en condiciones óptimas. Todas las líneas derivadas mantuvieron el cariotipo normal y expresaron un fenotipo totipotente, incluida la capacidad de diferenciarse en trofectodermo y las tres capas germinales.