Comparación de la eficiencia de reprogramación entre la transducción de factores de reprogramación, la fusión célula-célula y la fusión de citoplastos.

La reprogramación de células somáticas humanas en células pluripotentes abre nuevas posibilidades para la terapia de trasplantes, el estudio de enfermedades y la detección de fármacos. Además de la transferencia nuclear de células somáticas, se han informado varios enfoques para reprogramar células humanas: transducción de factores de transcripción definidos para generar células madre pluripotentes inducidas (iPSC), fusión de células madre embrionarias humanas (hESC)-células somáticas y hESC citoplasto-somáticas. fusión celular o exposición a extractos de hESC. Aquí, optimizamos las técnicas para la fusión y enucleación de hESC-fibroblastos humanos y la fusión de citoplastos, y luego comparamos la eficiencia de reprogramación entre la generación de iPSC, la fusión de células y la fusión de citoplastos. En comparación con las iPSC, la fusión de hESC proporcionó una reprogramación de células somáticas mucho más rápida y eficiente. La reprogramación requirió más de 4 semanas y la eficiencia fue inferior al 0.001% en la generación de iPSC, y fue inferior a 10 días y más del 0.005% en la fusión de hESC. Además, la fusión casi no produjo colonias de células parcialmente reprogramadas. Sin embargo, las células fusionadas eran tetraploides o aneuploides. La fusión del citoplasto hESC pudo iniciar la reprogramación pero nunca pudo completarla. Estos datos indican que en la fusión celular, como en la transferencia nuclear, la reprogramación mediante la introducción directa de un núcleo somático en el entorno de una célula pluripotente proporciona una reprogramación relativamente eficiente. Los hallazgos también sugieren que el núcleo de la célula pluripotente huésped puede contener componentes que aceleran el proceso de reprogramación.